Một phương pháp khoa học để định lượng NMN trong các mẫu sinh học
1. Giới thiệu
Bổ sung nicotinamide mononucleotide (NMN) để điều chỉnh tăng mức độ nicotinamide adenine dinucleotide (NAD +) đã được tiết lộ là một can thiệp chống lão hóa đầy hứa hẹn. Tuy nhiên, việc định lượng chính xác các chất trung gian NAD+ vẫn là một thách thức nghiêm trọng, NMN nói riêng. Nghiên cứu này được hỗ trợ để giới thiệu một phương pháp mới, phương pháp LC-MS / MS qua trung gian đồng vị kép (dimeLC-MS / MS), để định lượng chính xác NMN trong các mẫu sinh học.
2. Các yếu tố ảnh hưởng đến việc phát hiện chính xác NMN
NMN khó phát hiện chính xác do dễ bị phân hủy enzym, chuyển đổi trong quá trình xử lý mẫu, các hành vi phức tạp của nó trong các điều kiện cột và chiết xuất khác nhau, cũng như hiệu ứng ma trận.
Cụ thể, NMN có đặc tính phân cực cao và độ bay hơi thấp, dễ hòa tan trong nước nhưng khó hòa tan trong dung môi hữu cơ. Những đặc tính này hạn chế rất nhiều việc áp dụng nhiều phương pháp phân tích định lượng thông thường.
BMẫu iological Nhưmáu mang các hoạt động đáng kể của CD38 và CD73 (ecto-5’-nucleotidase), cả hai đều có thể sử dụng NMN làm chất nền.
Hành vi của NMN trong cột rất phức tạp, có lẽ do tính chất lưỡng phần của điện tích của nó, do đó sự khác biệt tinh tế trong điều kiện chiết xuất và cột ảnh hưởng đáng kể đến việc phát hiện NMN đáng tin cậy và chính xác.
3. Chiến lược đối phó của DimeLC-MS / MSđể giảm tác động của các yếu tố tác động
Để tránh sự can thiệp của các yếu tố nêu trên, một cột nguyên mẫu NMN-2 được áp dụng. Cột này chứa các hạt silica có độ tinh khiết cao dựa trên C18 có khả năng liên kết các hợp chất ưa nước hơn các hạt carbon, cải thiện khả năng tách.
Axit perchloric (PCA) được sử dụng vì nó có thể chiết xuất NAD + và NMN một cách hiệu quả từ các mẫu sinh học như huyết tương với tổn thất tối thiểu.
Để điều chỉnh hiệu ứng ma trận, một lượng cố định (1 μM) của mỗi hợp chất đồng vị được thêm vào các mẫu sinh học trước khi chiết xuất PCA.
4. Ưu điểmscủa dimeLC-MS / MS
Các tiêu chuẩn NMN đồng vị kép, NMN (M + 14) và NMN (M + 5), trong phương pháp điều khiển LC-MS / MS có thể theo dõi chính xác số phận của NMN trong quá trình xử lý mẫu, giúp tăng đáng kể độ chính xác và độ tin cậy của phép đo NMN trong các mẫu sinh học. Bên cạnh đó, dimeLC-MS / MS có thể đánh giá hiệu quả chiết xuất và nồng độ tuyệt đối của NMN trong các loại mẫu sinh học khác nhau.
5. Kết luận
ThLàLC-MS / MS mới-phương pháp điều khiển với các tiêu chuẩn NMN đồng vị kép có thể đo NMN trong các mẫu sinh học một cách chính xác và đáng tin cậy.Nó có thể được sử dụng cho các nghiên cứu trong tương lai về lượng NMN.
6. Tài liệu tham khảo
Unno, Junya và cộng sự. "Định lượng tuyệt đối nicotinamide mononucleotide trong các mẫu sinh học bằng sắc ký lỏng qua trung gian đồng vị kép-khối phổ song song (dimeLC-MS / MS)." npj lão hóa tập 10,1 2. Ngày 2 tháng 1 năm 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Tại sao chọn BONTAC?
BONTAC là nhà lãnh đạo toàn cầu NMN công nghiệp. Chúng tôi có công nghệ xúc tác toàn bộ enzyme đầu tiên ở Trung Quốc, và đã trở thành doanh nghiệp hàng đầu về các sản phẩm coenzyme được sử dụng rộng rãi trong ngành công nghiệp y tế, y tế và làm đẹp, nông nghiệp xanh, y sinh và các lĩnh vực khác. Đáng chú ý, BONTAC là NMN nhà cung cấp nguyên liệu thô của đội ngũ David Sinclair nổi tiếng tại Đại học Harvard. Dịch vụ và sản phẩm của chúng tôi là đáng tin cậy. Hơn nữa BONTAC có một trung tâm nghiên cứu công nghệ kỹ thuật coenzyme độc lập ở cấp tỉnh ở Trung Quốc và các nhà máy tự sở hữu, nơi có thể đảm bảo độ tinh khiết và ổn định của sản phẩm.
Disclaimer
ThLà bài viết làdựa trên tham chiếu trongtạp chí học thuật. Thông tin liên quan là cung cấp chỉ dành cho mục đích chia sẻ và học tập, và không đại diện cho bất kỳ mục đích tư vấn y tế nào. Nếu có bất kỳ vi phạm nào, vui lòng sự tiếp xúcTác giả choDeletion. Các quan điểm được thể hiện trong bài viết này không đại diện cho quan điểm của BONTAC.