01 Tháng Một
Ưu điểm đặc biệt của ELISA siêu nhạy với chu kỳ Thio-NAD trong việc xác định protein Dengue NS1
1. Giới thiệu
Sốt xuất huyết là một bệnh truyền nhiễm cấp tính doVirus sốt xuất huyếtthông qua vết đốt của muỗi Aedes (Ae. aegypti hoặc Ae. albopictus) bị nhiễm bệnh,với các triệu chứng chính như sốt cao, chóng mặt, nhức đầu, phát ban vàNghiêm trọngđau (đau mắt, cơ, khớp hoặc xương), v.v. Bệnh này phổ biến rộng rãi ở vùng khí hậu nhiệt đới và cận nhiệt đới. Ước tính có khoảng 100 đến 400 triệu người bị nhiễm bệnh mỗi năm, trong đó hơn 80% thường nhẹ và không có triệu chứng. Tuy nhiên, sốt xuất huyết nặng có thể làm tăng nguy cơ tử vong nếu không được điều trị đúng cách. Vì vậy, chẩn đoán sớm bệnh này có ý nghĩa quan trọng đối với việc điều trị kịp thời.Đáng chú ý, protein phi cấu trúc 1 (NS1), một glycoprotein được bảo tồn cao, chủ yếu được tiết ra trong quá trình nhiễm trùngSốt xuất huyếtvi rút, được coi là yếu tố sinh bệnh học chính củaSốt xuất huyết. Do đó, NSI thường được sử dụng như một dấu ấn sinh học để phát hiện sớm bệnh này.
Trong nghiên cứu này, một xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme sandwich(ELISA)kết hợp vớithio nicotinamide adenine dinucleotide (thio-NAD/S-NAD)Phương pháp đạp xe (sau đây gọi là ELISA siêu nhạy) được sử dụng để phát hiện NSI, sau đó là so sánh với NAAT để xác nhận độ chính xác phát hiện của nó.
2. Ưu nhược điểm của phương pháp phát hiện truyền thống đối vớiSốt xuất huyết
Hiện tại, tDưới đây là bốn phương pháp phát hiện chínhcho Sốt xuất huyết.
Phân lập và xác định virus có độ đặc hiệu cao nhưng tốn thời gian, mất ít nhất 5 ngày. Xét nghiệm kháng nguyên nhanh là nhanh nhất và tiết kiệm chi phí nhất trong số các phương pháp khác, nhưng độ nhạy và độ đặc hiệu tương đối thấp. Xét nghiệm huyết thanh dựa trên IgM và IgG bị giới hạn bởi số ngày nhiễm trùng, nhưCácxét nghiệm phải được trì hoãn cho đến khi mức kháng thể tăng đến mức có thể phát hiện được.
Trong phòng khám, NAAT thường được áp dụng để xác địnhSốt xuất huyếtbởi bụi bẩn có độ nhạy và độ đặc hiệu cao của nó. Tuy nhiên, phương pháp này tốn kém, tốn công sức và dễ xảy ra dương tính giả, phải được thực hiện bởi nhân viên được đào tạo.Để khắc phục nhược điểm của các phương pháp này, một phương pháp phát hiện mớiELISA siêu nhạy là được áp dụng trong nghiên cứu này.
3. Quy trình làm việc của ELISA siêu nhạy với chu kỳ thio-NAD
Một cặp kháng thểLàđược sử dụng để bắt protein NS1 trong bánh mì kẹp ELISA và phosphatase kiềmLàđược dán nhãn trên kháng thể thứ cấp. Ngoài các kháng thể, một dẫn xuất androsterone, 3α-hydroxysteroid dehydrogenase, thio-NAD và NADHlàđược sử dụng để xây dựng hệ thống chu kỳ enzyme thio-NAD. Trong phản ứng chu kỳ thio-NAD, thio-NADH liên tục tích lũy theo kiểu số tam giác và có thể được đo trực tiếp ở độ hấp thụ 405 nm.
4. So sánh ELISA và NAAT siêu nhạy trong phát hiện Dengue NS1 Protein
Trong NAAT, 60 mẫu dương tính với sốt xuất huyết và 25 mẫu âm tính với sốt xuất huyết. Giá trị ngưỡng chu kỳ NAAT (CT) của các mẫu bệnh phẩm dương tính với sốt xuất huyết nằm trong khoảng từ 12,42 đến 31,41.Trong ELISA siêu nhạy, 59 mẫu dương tính tương ứng với kết quả NAAT, trong khi 25 mẫu hoàn toàn âm tính với kết quả NAAT.So với NAAT, độ nhạy và độ đặc hiệu của ELISA siêu nhạy lần lượt là 98,3% và 100% (Bảng 2). Trong số 60 mẫu bệnh nhân dương tính với sốt xuất huyết được NAAT xác nhận, chỉ có 1 mẫu âm tính trong ELISA siêu nhạy. Dữ liệu của NAAT cho thấy mẫu bệnh phẩm là một trường hợp nhiễm DENV loại 4 với giá trị CT là 21,59. Kết quả của ELISA siêu nhạy gần như hoàn toàn phù hợp với kết quả NAAT, với giá trị kappa là 0,972 (95% CI: 0,917-1.0).
5. Kết luận
Phương pháp ELISA siêu nhạy rất dễ thực hiện và không yêu cầu thực tập sinh chuyên nghiệp để vận hành. Việc phát hiện có thể được bắt đầu ngay sau khi nhận được một mẫu nhỏ. Nó đặc biệt thích hợp để phát hiện sớm bệnh sốt xuất huyết ở các nước có thu nhập thấp.Tham khảo
Chen, Po-Kai và cộng sự, "Phương pháp phát hiện nâng cao cho protein sốt xuất huyết NS1 bằng cách sử dụng ELISA siêu nhạy với chu kỳ Thio-NAD." Virus, tập 15,9, 1894. 8 tháng 9 năm 2023, doi:10.3390/v15091894Ưu điểm và tính năng của sản phẩmBONTAC Thio-NAD/S-NAD
BONTAC là omột trong số ít doanh nghiệp trongTrung Quốccó thể tạo ra Thio-NADvới"Bonzyme"Phương pháp toàn bộ enzym(thân thiện với môi trường;Không có dư lượng dung môi độc hại) và Công nghệ lọc bảy bước "Bonpure" độc đáo. BONTAC tích hợp R&D, sản xuất và bán hàng, với nhà máy tự sở hữu và một số chứng nhận quốc tế đảm bảo chất lượng cao và cung cấp sản phẩm ổn định.