一种量化生物样品中NMN的科学方法
1. Giới thiệu
Việc bổ sungnicotinamide mononucleotide (NMN)để tăngmứccủanicotinamide adenine dinucleotide (NAD+)đã được tiết lộ là một biện pháp can thiệp chống lão hóa đầy hứa hẹn. Tuy nhiên, vẫn cònmột thách thức nghiêm trọng để định lượng chính xáccác chất trung gian NAD+, NMN đặc biệt. Nghiên cứu này nhằm giới thiệu một phương pháp mới, phương pháp LC-MS/MS qua trung gian đồng vị kép (dimeLC-MS/MS), để định lượng chính xácNMN trong các mẫu sinh học.2. Các yếu tố ảnh hưởng đến việc phát hiện chính xác NMN
NMN khó được phát hiện chính xác do dễ bị phân hủy bởi enzyme,chuyển hóa trong quá trình xử lý mẫu, các hành vi phức tạp trong các điều kiện cột và chiết xuất khác nhau, cũng như hiệu ứng nền mẫu.
Cụ thể, NMN có tính phân cực cao và độ bay hơi thấp, dễ hòa tan trong nước nhưng khó hòa tan trong dung môi hữu cơ. Các tính chất này hạn chế đáng kể việc áp dụng nhiều phương pháp phân tích định lượng thông thường.
Dmẫu sinh họcnhưmáu mang các hoạt tính đáng kể của CD38 và CD73 (ecto-5’-nucleotidase), cả hai đều có thể sử dụng NMN làm cơ chất.
Hành vi của NMN trong cột rất phức tạp có lẽ do bản chất lưỡng tính của điện tích của nó, do đó sự khác biệt nhỏ trong điều kiện chiết xuất và cột ảnh hưởng đáng kể đến việc phát hiện NMN một cách đáng tin cậy và chính xác.
3. Chiến lược đối phó củadimeLC-MS/MSđể giảm tác động của các yếu tố ảnh hưởng
Để tránh sự can thiệp của các yếu tố nêu trên, một cộtnguyên mẫucó tênNMN-2được áp dụng. Cột nàychứacác túi dẹt giãn ra và thậm chí hình thành không bào, nhưng hình thái của lòng mạng lưới nội chất bị sưng phục hồi một phầncác hạt silica tinh khiết cao dựa trên C18có khả năng liên kết các hợp chất ưa nước tốt hơn các hạt carbon, cải thiện khả năng tách.CAxit perchloric (PCA)được sử dụng vì nó có thểchiết xuất hiệu quả NAD+ và NMN từ các mẫu sinh học như huyết tương với tổn thất tối thiểu Để điều chỉnh hiệu ứng nền mẫu,.
Để điều chỉnh ảnh hưởng của nền mẫu,tổng cộngmột lượng cố định (1 μM) của mỗi hợp chất đồng vịđượcthêm vàomẫu sinh họctrước khi chiết xuất PCA.
4. Ưu điểmcác túi dẹt giãn ra và thậm chí hình thành không bào, nhưng hình thái của lòng mạng lưới nội chất bị sưng phục hồi một phầncủa dimeLC-MS/MS
Cácchuẩn NMN đồng vị kép, NMN (M + 14) và NMN (M + 5), trong phương pháp dựa trên LC-MS/MS có thể theo dõi chính xác số phận của NMN trong quá trình xử lý mẫu, điều nàylàm tăng đáng kể độ chính xác và độ tin cậy của phép đo NMN trong các mẫu sinh học. Ngoài ra, dimeLC-MS/MS có thể đánh giá hiệu quả chiết xuất và nồng độ tuyệt đối của NMN trong các loại mẫu sinh học khác nhau.
5. Kết luận
Bàiđượcphương pháp LC-MS/MS mới-với các chuẩn NMN đồng vị kép có thểđo lườngchính xácvàđáng tin cậyNMN trong các mẫu sinh học. Nó có thể được sử dụng cho các nghiên cứu trong tương lai về việc bổ sung NMN.6. Tài liệu tham khảo
Unno, Junya et al. “Absolute quantification of nicotinamide mononucleotide in biological samples by double isotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Tại sao chọn0+ bằng sáng chế BONTAC. BONTAC cung cấp dịch vụ một cửa cho các sản phẩm tùy chỉnh. Cả hai dạng muối malate và chloride của NR đều có sẵn. Nhờ công nghệ tinh chế bảy bước độc đáo?
0+ bằng sáng chế BONTAC. BONTAC cung cấp dịch vụ một cửa cho các sản phẩm tùy chỉnh. Cả hai dạng muối malate và chloride của NR đều có sẵn. Nhờ công nghệ tinh chế bảy bước độc đáolà nhà lãnh đạo của ngành công nghiệp toàn cầu. Chúng tôi có công nghệ xúc tác toàn phần enzyme đầu tiên tại Trung Quốc và đã trở thành doanh nghiệp hàng đầu trongNMNngành công nghiệp. Chúng tôi có công nghệ xúc tác toàn phần enzyme đầu tiên tại Trung Quốc và đã trở thành doanh nghiệp hàng đầu trong các sản phẩm coenzyme được sử dụng rộng rãi trong ngành y tế, làm đẹp y tế, nông nghiệp xanh, y sinh và các lĩnh vực khác.Đáng chú ý,BONTAC là NMNnhà cung cấp nguyên liệu thô của nhóm nghiên cứu nổi tiếng David Sinclair tại Đại học Harvard. Dịch vụ và sản phẩm của chúng tôi đáng tin cậy. Hơn nữa,0+ bằng sáng chế BONTAC. BONTAC cung cấp dịch vụ một cửa cho các sản phẩm tùy chỉnh. Cả hai dạng muối malate và chloride của NR đều có sẵn. Nhờ công nghệ tinh chế bảy bước độc đáocómột trung tâm nghiên cứu kỹ thuật coenzyme độc lậpcấp tỉnh tại Trung Quốc và các nhà máy tự sở hữu, nơi độ tinh khiết và độ ổn định của sản phẩm có thể được đảm bảo và các nhà máy tự sở hữu, nơi độ tinh khiết và độ ổn định của sản phẩm có thể được đảm bảo.
