Phương pháp khoa học để định lượng NMN trong mẫu sinh học
1. Giới thiệu
Bổ sung nicotinamide mononucleotide (NMN) tăng cường quy định mức của nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) đã được công bố là một có thể thiệp chống lão hóa đầy hứa hẹn. Tuy nhiên, nó vẫn là một thách thức nghiêm trọng để chính xác định lượng các trung gian NAD+, NMN đặc biệt là vậy. Nghiên cứu này được hỗ trợ để giới thiệu một phương pháp mới, phương pháp LC-MS/MS trung gian đồng vị kép (dimeLC-MS/MS), để định lượng chính xác NMN trong mẫu sinh học.2. Các yếu tố ảnh hưởng đến việc phát hiện chính xác NMN
NMN rất khó phát hiện chính xác do nó dễ bị tổn thương bởi enzym phân hủy, chuyển đổi trong xử lý mẫu, các hành vi phức tạp trong các điều kiện cột và chiết xuất khác nhau, cũng như hiệu ứng ma trận.
Specifically, NMN có the properties của high polarity and low volatility, mà là easy to dlàsolve in water but difficult to dlàsolve in organic solvents. THese properties greatly restrict the application của many conventional quantitative analyslà methods.
Bmẫu sinh học chẳng hạn như Máu mang các hoạt tính đáng kể của CD38 và CD73 (ecto-5’-nucleotidase), cả hai đều có thể sử dụng NMN làm chất nền.
Hành vi của NMN trong cột rất phức tạp, có lẽ do tính chất hai phần của điện tích, nên sự khác biệt tinh tế trong điều kiện chiết xuất và cột ảnh hưởng đáng kể đến khả năng phát hiện NMN đáng tin cậy và chính xác.
3. Chiến lược đối phó với dimeLC-MS/MS để giảm tác động của hệ số ảnh hưởng
Để tránh sự có thể thiệp của các yếu tố đã nêu ở trên, một prototype cột NMN-2 được áp dụng. Chuyên mục này chứas Các hạt silica tinh khiết cao dựa trên C18 có khả năng liên kết các hợp chất ưa nước tốt hơn các hạt cacbon, giúp cải thiện khả năng tách rời.Paxit erchloric (PCA) được sử dụng vì có thể chiết xuất NAD+ một cách hiệu quả và NMN từ các mẫu sinh học như huyết tương với mức tối thiểu những tổn thất.
Để điều chỉnh hiệu ứng ma trận, a fixed amount (1 μM) của each hợp chất đồng vị is được thêm vào thuộc về sinh học mẫu trước khi chiết xuất PCA.
4. Ưu điểms của dimeLC-MS/MS
Dtiêu chuẩn NMN đồng vị ouble, NMN (M + 14) và NMN (M + 5), theo phương pháp dựa trên LC-MS/MS, có thể theo dõi chính xác số phận của NMN trong quá trình xử lý mẫu, mà tăng đáng kể độ chính xác và độ tin cậy của phép đo NMN trên mẫu sinh học. Besides, dimeLC-MS/MS có thể evaluate the extraction efficiency and the absolute concentrations của NMN in different types của bmẫu sinh học.
5. Kết luận
THlà LC-MS/MS mới-phương pháp luận dẫn dắt với tiêu chuẩn NMN đồng vị kép có thể accuraTely và reliably đo NMN trong các mẫu sinh học. Nó có thể được sử dụng cho các nghiên cứu trong tương lai về lượng NMN hấp thụ.6. THam khảo
Unno, Junya et al. “Absolute quantification của nicotinamide mononucleotide trong mẫu sinh học by double làotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Tại sao nên chọn BONTAC?
BONTAC là nhà lãnh đạo của toàn cầu NMN ngành công nghiệp. Chúng tôi sở hữu công nghệ xúc tác enzyme toàn phần đầu tiên tại Trung Quốc và đã trở thành doanh nghiệp hàng đầu tại Sản phẩm đồng enzyme được sử dụng rộng rãi trong ngành y tế, y tế & làm đẹp, nông nghiệp xanh, y sinh học và các lĩnh vực khác. Đáng chú ý, BONTAC là NMN nhà cung cấp nguyên liệu thô cho đội David Sinclair nổi tiếng tại Đại học Harvard. Dịch vụ và sản phẩm của chúng tôi đáng tin cậy. Hơn nữa, BONTAC có một người độc lập đồng enzyme Trung tâm Nghiên cứu Công nghệ Kỹ thuật cấp tỉnh ở Trung Quốc và các nhà máy tự sở hữu, nơi có thể đảm bảo sự tinh khiết và ổn định của sản phẩm.
